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恒温扩增荧光法检测技术 应用于食品中致病菌快速检测
发布时间：2017-09-15 浏览次数：3091 分享：
一、技术原理：
试剂盒基于环介导恒温扩增技术(LAMP)荧光法检测，利用两对特殊引物和具有链置换活性的Bst DNA聚合酶，使模板两端引物结合处循环出现环状单链结构，引物顺利与模板结合并进行链置换扩增反应，实现在恒温条件下（60-65℃）进行连续快速扩增。反应体系中加入了显色指示剂，阴阳性结果显色差异显著，扩增结束后可以通过观察荧光显色剂的颜色变化判读结果，无需开盖避免了扩增产物交叉感染性的可能性。LAMP是一种新型的恒温核酸扩增技术，该技术无需常规PCR中变性、退火、延伸等步骤不同温度设计要求，只需提供一个适宜的恒定温度即可，因此，与常规PCR相比，LAMP技术更适合现场高通量快速检测，具有简单、快速、特异性强的特点。
二、应用范围
恒温扩增荧光法检测技术可运用于快速检测食品中的沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、志贺氏菌、单核增生李斯特菌、副溶血弧菌、大肠杆菌O157：H7、阪崎肠杆菌、小肠结肠耶尔森氏菌、铜绿假单胞菌、粪肠球菌、产气荚膜梭菌。
应用于食品快速检测有两种方式：
1、快速筛查。对食品样品快速增菌后，直接采用基因检测试剂盒来快速筛查有没可疑致病菌（对大多数致病菌在13小时内即可完成筛查）；
2、快速鉴定。对食品样品进行增菌，平板分离，使用基因检测试剂盒对可疑菌落进行快速准确的鉴定（1小时内完成鉴定）。
三、快速筛查食品中致病菌操作流程
四、快速鉴定可疑菌落操作流程
五、环凯恒温扩增试剂盒特点
操作简单：通过几部加样后，60-65℃范围内恒温条件下即可完成扩增。
使用便捷：一管式冻干，免去繁琐的配制步奏。
仪器简单：扩增条件简单，能提供恒温装置即可。
特异性高：比传统PCR灵敏度高10-100倍，可检测5-20个拷贝。
快速判读：使用合适的增菌液收集到足够菌体后，40-60分钟内可完成检测，肉眼观察颜色变化即可判读结果。全部检验流程仅需约13h（详细检验流程参见说明书）。
六、环凯恒温扩增试剂盒组成
七、环凯恒温扩增试剂盒操作指南
八、恒温扩增试剂盒产品列表
九、恒温扩增快速检测所需配套增菌培养基列表
拾、恒温扩增快速检测需要配套的仪器及耗材列表
