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恒温扩增荧光法检测技术应用于食品中沙门氏菌的快速检测

发布时间:2017-10-13      浏览次数:2386    分享:

       一、技术原理

       试剂盒基于环介导恒温扩增技术(LAMP)荧光法检测,利用两对特殊引物和具有链置换活性的Bst DNA聚合酶,使模板两端引物结合处循环出现环状单链结构,引物顺利与模板结合并进行链置换扩增反应,实现在恒温条件下(60-65℃)进行连续快速扩增。反应体系中加入了显色指示剂,阴阳性结果显色差异显著,扩增结束后可以通过观察荧光显色剂的颜色变化判读结果,无需开盖避免了扩增产物交叉感染性的可能性。LAMP是一种新型的恒温核酸扩增技术,该技术无需常规PCR中变性、退火、延伸等步骤不同温度设计要求,只需提供一个适宜的恒定温度即可,因此,与常规PCR相比,LAMP技术更适合现场高通量快速检测,具有简单、快速、特异性强的特点。

        二、应用于食品中沙门氏菌的快速检测

       恒温扩增荧光法检测技术可运用于快速检测食品中的沙门氏菌等致病菌。 应用于食品快速检测有两种方式: 1、快速筛查。对食品样品快速增菌后,直接采用基因检测试剂盒来快速筛查有没可疑致病菌(对大多数致病菌在13小时内即可完成筛查); 2、快速鉴定。对食品样品进行增菌,平板分离,使用基因检测试剂盒对可疑菌落进行快速准确的鉴定(1小时内完成鉴定)。

       三、环凯恒温扩增荧光法检测试剂盒组成

        四、环凯恒温扩增荧光法检测试剂盒操作指南


        五、环凯恒温扩增荧光法检测试剂盒特点

       操作简单:通过几部加样后,60-65℃范围内恒温条件下即可完成扩增。

       使用便捷:一管式冻干,免去繁琐的配制步奏。 仪器简单 扩增条件简单,能提供恒温装置即可。

       特异性高:比传统PCR灵敏度高10-100倍,可检测5-20个拷贝。

       快速判读:使用合适的增菌液收集到足够菌体后,40-60分钟内可完成检测,肉眼观察颜色变化即可判读结果。全部检验流程仅需约13h(详细检验流程参见说明书)。

       六、沙门氏菌快速筛选操作流程


       七、沙门氏菌可疑菌落快速鉴定操作流程

       八、恒温扩增试剂盒产品列表


       九、需要配套的仪器及耗材列表



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